甲胎蛋白核酸适配体的毛细管电泳激光诱导荧光分析

甲胎蛋白核酸适配体的毛细管电泳激光诱导荧光分析.pdf
本研究应用生物信息学软件直接甄选并优化AFP核酸适配体至45bp，序列为GTCGT-N35-TTTTA。使用ViennaRNA预测该适配体的二级结构，最小自由能为-4.80kcal/mol。在AFP核酸适配体的5’端用花氰染料5(Cy5)进行标记，将此适配体命名为SCy5，然后通过CE-LIF检测器进行特异性分析。将lOμMSCy5在95℃下变性5分钟，室温下缓慢冷却，然后与lOOμg/mLAFP混合后，置于37℃孵育10分钟。采用涂覆聚乙烯醇的熔融石英毛细管(40cm×50μm)进行分离，其分离电压为-8kV，温度为25℃，缓冲液为30mMNaH2P04(pH7.5)，激光波长和发射波长分别为650nm和680nm。根据分离分析结果，计算SCy5的解离常数(Kd)为0.2μM。将过量的SCy5加入到AFPPR性血清中进行孵育，得到免疫结合产物AFP-SCy5和过量的游离SCy5，利用CE可对AFP-SCy5和SCy5实现快速分离。
作者：王晨枫贾博黄利飞吕运开
作者单位：河北大学化学与环境科学学院,保定,071002
母体文献：第21届全国色谱学术报告会论文集
会议名称：第21届全国色谱学术报告会  
会议时间：2017年5月19日
会议地点：成都
主办单位：中国化学会
语种：chi
分类号：TP2TB3
关键词：甲胎蛋白  核酸适配体  毛细管电泳  激光诱导荧光
在线出版日期：2019年4月25日
基金项目：
相似文献
相关博文

2024-12-1 20:23 上传 甲胎蛋白核酸适配体的毛细管电泳激光诱导荧光分析.pdf

文件大小:

1.01 MB

下载次数:

60

高速下载