葡萄糖3脱氢酶工程菌的构建、表达及其合成3酮对硝基苯井冈霉胺

文档名：葡萄糖3脱氢酶工程菌的构建、表达及其合成3酮对硝基苯井冈霉胺
采用基因挖掘技术,从NCBI数据库发现来源于Glaciecolapolaris的葡萄糖3-脱氢酶基因,该基因经密码子优化后合成,构建pET28b-GpG3DH重组表达载体,转入大肠杆菌E.coliBL21中进行重组表达,结果显示:GpG3DH实现了部分可溶表达,其分子量为5.5×104.随后,优化了GpG3DH的表达条件,结果发现,重组菌在TB培养基中37℃培养至OD600为0.8时,加入IPTG至终浓度为0.5mmol/L,16℃诱导表达10h,GpG3DH酶活为2.83×10－2U/mL.进一步将重组菌用于3-酮对硝基苯井冈霉胺的细胞转化法合成,细胞用10mmol/L的EDTA处理,在pH为7.5、25℃的条件下转化32h,3-酮对硝基苯井冈霉胺的产率(Y3-KpNPV)为0.54.
作者：张建芬柯薇陈虹
作者单位：浙江树人大学生物与环境工程学院,浙江杭州310015
母体文献：中国化工学会第五届生物化工技术创新及产业发展研讨会暨第二届生物化工青年学者论坛论文集
会议名称：中国化工学会第五届生物化工技术创新及产业发展研讨会暨第二届生物化工青年学者论坛  
会议时间：2018年5月11日
会议地点：成都
主办单位：中国化工学会
语种：chi
分类号：
关键词：3-酮对硝基苯井冈霉胺  细胞转化  葡萄糖3-脱氢酶工程菌  基因挖掘
在线出版日期：2020年8月24日
基金项目：
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