文档名：一种适用于高分辨质谱分析的高效丝状真菌囊泡提取及蛋白制样方法
摘要：使用液氮冷冻研磨破碎真菌菌丝细胞,结合醋酸钠沉淀和超速离心纯化,获得的囊泡样品进一步使用超滤法浓缩和过滤,扫描电镜观察和蛋白电泳分析,实验结果显示所制备的真菌囊泡完整性好,蛋白纯度高,未见明显杂质污染,符合后续实验要求.进一步使用串联质谱标签技术联用高分辨生物质谱仪对真菌囊泡蛋白组进行分析,在提取的低毒病毒侵染后的真菌囊泡中成功鉴定到病毒蛋白的存在.实验方法的建立和优化,为丝状真菌囊泡提取、囊泡蛋白组学和病毒宿主相互作用研究提供了方法学保障.
Abstract：Thefungalmyceliumwasgroundbyliquidnitrogen,andthenpurifiedbysodiumacetateprecipitationandultracentrifugation.Theselectedvesiclesampleswerefurtherconcentratedandfilteredthroughultrafiltration.Scanningelectronmicroscopeobservationandproteinelectrophoresisanalysisshowedthatthepreparedfungalvesicleshadgoodintegrity,highproteinpurity,andnoobviousimpuritycontamination,whichmettherequirementsofsubsequentexperiments.Furthermore,tandemmasstags(TMT)combinedwithhigh-resolutionbiologicalmassspectrometrywasusedtoanalyzethefungalvesicleproteome.Theviralproteinswassuccessfullyidentifiedinthefungalvesiclesuponhypovirusinfection.Theestablishmentandoptimizationoftheexperimentalmethodinthispaperprovidesmethodologicalsupportforvesicleextraction,proteomicanalysisandvirus-hostinteractionresearchinfilamentousfungi.
作者：林南新 徐小雯 曾紫杉 王杰 王金子Author：LINNanxin XUXiaowen ZENGZishan WANGJie WANGJinzi
作者单位：广西民族大学海洋与生物技术学院,海洋生物资源保护与利用重点实验室,广西多糖材料及改性重点实验室,广西南宁530008
刊名：当代化工 ISTIC
Journal：ContemporaryChemicalIndustry
年，卷(期)：2024, 53(4)
分类号：R379
关键词：板栗疫病菌 囊泡 扫描电镜 质谱鉴定
Keywords：Cryphonectriaparasitica Vesicle Scanningelectronmicroscopy Massspectrometryidentification
机标分类号：O656.21R2TE622.1
在线出版日期：2024年5月17日
基金项目：国家自然科学基金一种适用于高分辨质谱分析的高效丝状真菌囊泡提取及蛋白制样方法[
期刊论文] 当代化工--2024, 53(4)林南新 徐小雯 曾紫杉 王杰 王金子使用液氮冷冻研磨破碎真菌菌丝细胞,结合醋酸钠沉淀和超速离心纯化,获得的囊泡样品进一步使用超滤法浓缩和过滤,扫描电镜观察和蛋白电泳分析,实验结果显示所制备的真菌囊泡完整性好,蛋白纯度高,未见明显杂质污染,符合后...参考文献和引证文献
参考文献
引证文献
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