基于开管电色谱法表征单克隆抗体变体的研究

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通过制备2种蛋白作为固定相的开管柱，应用开管电色谱法成功表征了单抗的电荷变体。首先选择牛血清白蛋白(BSA)作为固定相制备开管柱，通过层层自组装的方法制备了BSA修饰的涂层柱，并将其成功地应用于碱性蛋白的分离和单克隆抗体电荷异构体的分离。BSA涂层极大地改善了分辨率，有效地抑制了蛋白的吸附。此外，BSA涂层对单克隆抗体的电荷异构体表现了特殊的选择性。西妥昔单抗的七种不同形式的电荷异构体成功地获得分离，利妥昔单抗的两种碱性异构体和一种酸性异构体以及曲妥珠单抗的两种碱性电荷异构体和四种酸性异构体成功地从主峰中分离。牛血清白蛋白修饰的涂层柱表现了很好的重现性和稳定性。其次，根据凝血的机理一步法制备了纤维蛋白修饰开管柱，该开管柱也成功的应用于单抗电荷变体的表征，与BSA修饰开管柱相比，此柱制备更加简单，同时可成功应用于对单抗变体的表征。这些研究结果表明蛋白作为开管柱的固定相在对单抗电荷变体的表征方面具有一定的应用潜力。
作者：王文涛张亚敏肖雪贾丽
作者单位：华南师范大学生物光子学研究院,广州,510631
母体文献：第21届全国色谱学术报告会论文集
会议名称：第21届全国色谱学术报告会  
会议时间：2017年5月19日
会议地点：成都
主办单位：中国化学会
语种：chi
分类号：
关键词：单克隆抗体  电荷异构体  结构表征  开管电色谱
在线出版日期：2019年4月25日
基金项目：
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