HSV1糖蛋白B胞外区编码基因的真核表达及纯化鉴定

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应用基因工程技术构建、纯化单纯疱疹病毒1型截短(胞外区)糖蛋白B的亚单位疫苗。方法：通过对HSV1—gB蛋白的抗原表位分析,化学合成HSV1—gB胞外区含信号肽序列的基因序列。定向插入真核表达质粒pCEP4载体中,构建出重组真核表达质粒pCEP4—gB,并对其进行PCR鉴定、转染HEK293细胞,运用Ni—Sepharose6FastFlow亲和层析柱纯化。用WesternBlot检测纯化前后细胞表达上清的蛋白。结果：PCR鉴定结果显示,插入的克隆基因与GenBank中HSV—1F株gB基因序列一致,证实了重组真核表达质粒pCEP4—gB的构建；WesternBlot检测出经重组质粒转染的HEK293细胞明显表达出重组HSV1病毒gB糖蛋白。结论：获得重组HSV1gB胞外区蛋白,为研究预防HSV1的亚单位疫苗奠定一定基础。
作者：管文燕 王正茂 李琳 李越希
作者单位：南京医科大学基础医学院,南京210029南京医科大学基础医学院,南京210029南京军区军事医学研究所,江苏省医药生物技术重点实验室,南京210002
母体文献：第六届长三角科技论坛生物产业发展分论坛论文集
会议名称：第六届长三角科技论坛生物产业发展分论坛  
会议时间：2009年10月18日
会议地点：苏州
主办单位：江苏省生物技术协会,浙江省生物工程学会,上海市生物工程学会
语种：chi
分类号：
关键词：单纯疱疹病毒1型  糖蛋白B  真核表达  纯化鉴定  疫苗免疫
在线出版日期：2012年5月31日
基金项目：
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